布鲁克林水管工玛利欧和路易吉被神秘水管吸入蘑菇王国，为了救出被库巴囚禁的碧姬公主，两人踏上了吃蘑菇、踩乌龟的冒险。
玛利欧和路易吉是布鲁克林一对失意的水管工兄弟，他们的维修公司刚被竞争对手搞垮。一天夜里，他们接到一处老旧下水道的神秘维修订单，钻入后发现一段发光的五彩管道。二人被吸入异世界：路易吉掉进阴暗的“暗黑之境”，被库巴的军团抓获；玛利欧则坠入色彩斑斓的蘑菇王国。碧姬公主告诉他，库巴抢走了无敌星，准备用它的力量统治所有平行管道世界。玛利欧在奇诺比奥的指导下学习跳跃、踩踏和吃超级蘑菇变大。为了救弟弟，玛利欧与碧姬组成临时队伍，穿越丛林、雪地和岩浆洞穴。最终在库巴的移动城堡上，玛利欧利用管道工的本能——拧螺丝和通水管——破坏了库巴的动力核心。路易吉在关键时刻用一根钢管敲晕了库巴。彩蛋里，耀西的蛋裂开了一条缝。全片充满游戏彩蛋，但核心是笨拙哥哥为了弟弟可以跳一万次。
真正的“游戏精神”电影，而不是挂着IP的烂片。满满的游戏致敬细节让老玩家泪目，同时故事流畅到小朋友也能看懂。库巴的弹唱表白堪称年度笑点。纯粹、快乐、热血，这才是合家欢该有的样子。
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