小鼠伟福为了寻找失散的妹妹，搭上了一趟开往西部的牛粪车，开始了一段狂野的寻亲之旅。
承接第一部的结尾，伟福一家在纽约安顿下来。但伟福的妹妹小蒂娜在一次外出时被人错抓进了一个运往西部的货物箱，被火车带向了内华达沙漠。伟福瞒着父母，跳上一辆运牛粪的马车，开始了西部冒险。他在沙漠里遇到了一个独眼的“老耗子”枪手，这个老耗子曾是好莱坞西部片的动物演员，教伟福用弹弓“拔枪决斗”。两人追到了淘金小镇“老鼠沟”，小蒂娜被一个开赌场的老鼠老板控制，逼她钻火圈表演。伟福在“拔枪决斗”中赢了老鼠老板，赢得了小蒂娜的自由。但在返程的火车上，老耗子为了引开猎狗选择跳车，伟福哭着喊他，老耗子在夕阳下挥了挥牛仔帽。伟福回到家后，给妹妹的床头画了一幅画：一个独眼的老牛仔骑在沙漠的月亮上。
比第一部更狂野也更好哭。老耗子这个角色堪称年度动画最佳配角，他的牺牲戏处理得克制又悲壮。西进运动的背景与老鼠视角的结合妙趣横生，音乐水准依然在线，片尾那首《Moon Rider》会单曲循环很久。
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